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這篇研(yan)究(jiu)探討了壹種新(xin)的癌(ai)癥疫苗療法(fa)，該療法(fa)使(shi)用電(dian)穿孔技(ji)術(shu)將外源性卵白蛋(dan)白（OVA）蛋(dan)白加(jia)載到骨(gu)髓來(lai)源的樹突(tu)狀細(xi)胞(bao)（DCs）中(zhong)，並(bing)同時用(yong)α-半(ban)乳糖(tang)神(shen)經(jing)酰胺(an)（α-GalCer）刺(ci)激(ji)。
這個策(ce)略通(tong)過(guo)激(ji)活不(bu)變(bian)型自(zi)然(ran)殺(sha)傷性T細胞(bao)（iNKT）、自(zi)然(ran)殺(sha)傷性細胞(bao)（NK）和(he)固(gu)有(you)的DCs，增(zeng)強了針對(dui)腫瘤相關(guan)抗(kang)原的細胞毒性(xing)CD8+T細胞(bao)的誘導。此外(wai)，該策(ce)略可以長期維持抗(kang)原特(te)異性(xing)抗(kang)腫瘤T細胞反應。研(yan)究(jiu)結(jie)果表明(ming)，這種(zhong)新(xin)型的DCs疫苗能夠(gou)有(you)效地(di)誘(you)導抗(kang)原特(te)異性(xing)抗(kang)腫瘤免疫(yi)力，並(bing)通(tong)過(guo)誘(you)導組織駐(zhu)留(liu)記(ji)憶(yi)T細(xi)胞（TRM）實(shi)現持久(jiu)性的免疫(yi)保(bao)護(hu)。
01. 這項(xiang)研(yan)究(jiu)的主要(yao)目(mu)標(biao)是什麽(me)？
本(ben)研(yan)究(jiu)旨(zhi)在(zai)開(kai)發(fa)壹種新(xin)的癌(ai)癥疫苗策(ce)略，通(tong)過(guo)將外源卵清(qing)蛋白 (OVA) 電(dian)穿孔到骨(gu)髓來(lai)源的樹突(tu)狀細(xi)胞(bao) (DCs) 中(zhong)，並(bing)同時用(yong) α-半(ban)乳糖(tang)神(shen)經(jing)酰胺(an) (α-GalCer) 進行(xing)脈(mai)沖(chong)，從而(er)誘(you)導針對(dui)腫瘤抗(kang)原的細胞毒性(xing) CD8+ T 細胞(bao) (CTL)。
02. 為(wei)什麽(me)選(xuan)擇樹(shu)突(tu)狀細(xi)胞(bao)作為(wei)遞送(song)疫(yi)苗的載體(ti)？
樹(shu)突(tu)狀細(xi)胞(bao)是體(ti)內(nei)的抗(kang)原呈(cheng)遞細胞 (APC) 群(qun)體(ti)。它(ta)們在啟動(dong)和調(tiao)節針對(dui)腫瘤抗(kang)原的免疫(yi)反(fan)應方(fang)面起著(zhe)至關(guan)重要(yao)的作用(yong)。先(xian)前研(yan)究(jiu)表明(ming)，與遊(you)離α-GalCer給藥(yao)相比(bi)，用α-GalCer脈(mai)沖(chong)的CD1d表達(da)DC（形成α-GalCer-CD1d復(fu)合(he)物）的治療性給藥(yao)抑制了腫瘤生長和(he)轉移，並(bing)延(yan)長(chang)了荷(he)瘤宿(xiu)主(zhu)的存(cun)活時(shi)間(jian)。
03. OVA-EP-galDC 疫(yi)苗是如何(he)制備的？
從小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓中(zhong)提取(qu)未成熟(shu)的樹突(tu)狀細(xi)胞(bao) (imDCs)。然(ran)後(hou)用電穿孔將全(quan)長卵清(qing)蛋白 (OVA) 加(jia)載到 imDCs 中，用 α-GalCer 進行(xing)脈(mai)沖(chong)，並(bing)用(yong)脂多糖(tang) (LPS) 刺(ci)激(ji)以誘導成熟(shu)。
04. OVA-EP-galDC 疫(yi)苗(miao)如何(he)誘(you)導抗(kang)腫瘤免疫(yi)？
OVA-EP-galDC 疫(yi)苗通(tong)過(guo)激(ji)活不(bu)變(bian)自(zi)然(ran)殺(sha)傷 T (iNKT) 細胞啟動(dong)免疫(yi)級(ji)聯反(fan)應。活化的 iNKT 細胞隨後(hou)激(ji)活自(zi)然(ran)殺(sha)傷 (NK) 細胞和(he)內(nei)源(yuan)性 DC。這(zhe)些(xie)活(huo)化(hua)的 DC 交(jiao)叉呈(cheng)遞 OVA 抗(kang)原，從(cong)而(er)刺(ci)激(ji) OVA 特異性(xing) CD8+ T 細(xi)胞，包(bao)括組織駐(zhu)留(liu)記(ji)憶(yi) T (TRM) 細(xi)胞。
05. OVA-EP-galDC 疫苗在(zai)預(yu)防(fang)腫瘤方面有(you)效嗎？
是的，OVA-EP-galDC 疫苗在預(yu)防(fang)性(xing)模型中(zhong)顯(xian)示(shi)出(chu)顯(xian)著(zhe)的抗(kang)腫瘤效果。接受(shou) OVA-EP-galDC 疫(yi)苗接種(zhong)的小(xiao)鼠(shu)在(zai)隨(sui)後接受(shou) OVA 表達(da)腫瘤細胞 (EG7) 攻擊(ji)後(hou)，表現出(chu)腫瘤排(pai)斥。
06. CD8+ T 細(xi)胞在(zai) OVA-EP-galDC 疫(yi)苗(miao)介導的抗(kang)腫瘤免疫(yi)中(zhong)起什(shen)麽(me)作用(yong)？
CD8+ T 細(xi)胞(bao)對(dui)於 OVA-EP-galDC 疫苗的抗(kang)腫瘤作用(yong)至(zhi)關(guan)重要(yao)。CD8+ T 細(xi)胞(bao)耗(hao)竭(jie)顯(xian)著(zhe)降低(di)了疫苗(miao)的療效，導致腫(zhong)瘤生長增(zeng)加(jia)。
07. OVA-EP-galDC 疫苗誘(you)導記憶(yi) T 細(xi)胞反應嗎？
本(ben)研(yan)究(jiu)結(jie)果表明(ming)，OVA-EP-galDC 疫苗(miao)是壹種有(you)前景(jing)的抗(kang)腫瘤免疫(yi)治(zhi)療策(ce)略。它能(neng)夠(gou)誘導強大(da)的、抗(kang)原特(te)異性(xing)的 T 細胞反應(ying)，包(bao)括 TRM 細胞的生成，從(cong)而(er)導致腫(zhong)瘤排(pai)斥。該疫苗平臺(tai)有(you)可能(neng)針對(dui)各種癌(ai)癥進行(xing)開(kai)發(fa)和個性(xing)化(hua)，為(wei)癌(ai)癥患者提供(gong)有(you)效的治療選(xuan)擇。
在(zai)文(wen)中(zhong)，Maxcyte 電(dian)轉染技(ji)術(shu)被(bei)用(yong)於將完整的卵清(qing)蛋白 (OVA) 裝(zhuang)載到骨(gu)髓來(lai)源的未成熟(shu)樹(shu)突(tu)狀細(xi)胞(bao) (imDCs) 中(zhong)，用於制備 OVA-EP-galDC 疫苗。
(1) 高(gao)效裝(zhuang)載(zai)抗(kang)原：與(yu)傳(chuan)統(tong)的共(gong)培(pei)養方(fang)法(fa)相(xiang)比(bi)，Maxcyte 電(dian)轉(zhuan)染技(ji)術(shu)可(ke)以將更(geng)高濃(nong)度(du)的 OVA 裝載到 imDCs 中，從而提高抗(kang)原呈(cheng)遞效率(lv)。
(2) 維(wei)持細(xi)胞活(huo)力：盡管(guan)電轉(zhuan)染過(guo)程(cheng)會對(dui)細胞造成壹定損(sun)傷，但(dan)與(yu)高(gao)濃(nong)度(du) OVA 共(gong)培(pei)養相(xiang)比(bi)，Maxcyte 電轉染技(ji)術(shu)處理(li)後的 imDCs 活力更(geng)高。
通(tong)過(guo) Maxcyte 電(dian)轉染技(ji)術(shu)，研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)可以高效地(di)將 OVA 抗(kang)原裝(zhuang)載(zai)到 DCs 中，並(bing)制備出(chu)高效的 OVA-EP-galDC 疫苗，為(wei)腫瘤免疫(yi)治(zhi)療提供(gong)了壹種新(xin)的策(ce)略。
(* 本(ben)文(wen)轉(zhuan)載(zai)自「拓(tuo)普百奧」微(wei)信(xin)公(gong)眾號(hao)，已獲(huo)得(de)授權(quan))
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