摘要
建(jian)立(li)了(le)壹套(tao)同(tong)時(shi)支持兩(liang)套(tao)溶出(chu)儀(yi)的全自(zi)動(dong)溶出(chu)、在線(xian)稀(xi)釋和檢測系統，重點(dian)研究了(le)兩(liang)套(tao)溶出(chu)儀(yi)、雙(shuang)取樣泵(beng)、雙(shuang)補(bu)液系統、稀(xi)釋平臺、UV進(jin)樣系統和(he)UV檢測工(gong)作時(shi)的時(shi)序調(tiao)度，確保整(zheng)套方(fang)案在符(fu)合(he)藥典(dian)要(yao)求的情況(kuang)下(xia)，各子(zi)系統之間不會發生沖(chong)突，並(bing)達(da)到(dao)效(xiao)率(lv)的(de)目(mu)的。系統采用鹽(yan)酸氨溴(xiu)索(suo)片(pian)進(jin)行(xing)驗(yan)證，在30mins內(nei)采樣5次(ci)，共(gong)60個(ge)樣品(pin)，並(bing)自(zi)動(dong)協(xie)調(tiao)稀(xi)釋、進(jin)樣和(he)檢測等(deng)過(guo)程(cheng)，實驗表(biao)明，采用該(gai)時(shi)序調(tiao)度的(de)方(fang)案可確保實驗結(jie)果(guo)符(fu)合要(yao)求，並且在現(xian)有(you)方法(fa)上將效(xiao)率(lv)提高了(le)100%以(yi)上。
正(zheng)文(wen)
隨(sui)著仿制藥壹致(zhi)性(xing)評(ping)價(jia)等工(gong)作的(de)開展(zhan)，各相關(guan)藥品(pin)檢測單(dan)位和(he)制(zhi)藥企(qi)業(ye)的儀(yi)器及(ji)設(she)備(bei)配套(tao)有必(bi)要進(jin)壹步完善。為(wei)此，特(te)建(jian)立(li)了(le)壹套(tao)同(tong)時(shi)全自(zi)動(dong)雙(shuang)溶出(chu)、在線(xian)稀(xi)釋和檢測系統。與(yu)市(shi)場上(shang)現(xian)有(you)的自(zi)動(dong)溶出(chu)儀(yi)相比，該系統不(bu)僅能(neng)完成(cheng)前(qian)者具備(bei)的(de)溶出(chu)、采樣和(he)補(bu)液工(gong)作，還(hai)具(ju)備(bei)自(zi)動(dong)稀(xi)釋、UV進(jin)樣、UV檢測以(yi)及數據(ju)分析等功(gong)能。此外(wai)，為(wei)滿(man)足(zu)壹致(zhi)性(xing)評(ping)價(jia)和客(ke)戶批量處(chu)理樣品(pin)的(de)需求，系統還(hai)同(tong)時(shi)接(jie)入了(le)兩(liang)套(tao)溶出(chu)儀(yi)。
系統采用鹽(yan)酸氨溴(xiu)索(suo)(ambroxolhydrochloride，1)片(pian)的(de)溶出(chu)度試(shi)驗進(jin)行(xing)驗(yan)證。1為(wei)溴(xiu)己新的(de)活(huo)性(xing)代謝(xie)產物，主要(yao)用於(yu)急(ji)慢性(xing)支氣(qi)管(guan)炎、哮(xiao)喘性(xing)支氣(qi)管(guan)炎、支(zhi)氣(qi)管(guan)擴張(zhang)、肺結(jie)核等引(yin)起(qi)的咳(ke)痰(tan)困(kun)難及手(shou)術(shu)前(qian)後咳(ke)痰困(kun)難(nan)[1]。由(you)於(yu)1屬速(su)溶型(xing)藥物，溶出(chu)曲(qu)線(xian)的取(qu)樣時(shi)間點(dian)設計為(wei)5、10、15、20及(ji)30min，為(wei)使(shi)最(zui)終(zhong)數據(ju)具(ju)統(tong)計學(xue)意義(yi)(n≥10)，每(mei)批次(ci)試(shi)驗樣品(pin)數量(liang)設(she)計為(wei)12片(pian)，該(gai)工(gong)作具(ju)有采樣時(shi)間間隔(ge)短(duan)、樣品(pin)數量(liang)多(duo)且勞(lao)動(dong)強(qiang)度大(da)的特(te)點(dian)，可用以(yi)充(chong)分驗證系統在復(fu)雜(za)條(tiao)件(jian)下(xia)的工(gong)作狀(zhuang)況(kuang)。
1方案概況(kuang)
全自(zi)動(dong)雙(shuang)溶出(chu)在線(xian)稀(xi)釋和檢測系統是指能同(tong)時(shi)支持兩(liang)套(tao)溶出(chu)儀(yi)，並且(qie)可以(yi)自(zi)動(dong)完成(cheng)溶出(chu)、取樣、補(bu)液、稀(xi)釋、UV進(jin)樣、讀(du)數、數據(ju)分析和打印報告(gao)等(deng)溶出(chu)全過(guo)程(cheng)的(de)溶出(chu)系統，
2雙(shuang)溶出(chu)系統時(shi)序研究
由(you)於(yu)雙(shuang)溶出(chu)系統同(tong)時(shi)支持兩(liang)套(tao)溶出(chu)儀(yi)、兩(liang)臺采樣泵(beng)、兩(liang)套(tao)補(bu)液系統、稀(xi)釋平臺、進(jin)樣子(zi)系統和(he)UV檢測器等(deng)多(duo)個(ge)儀(yi)器，這(zhe)些儀(yi)器可(ke)能(neng)來源(yuan)於(yu)不同(tong)廠(chang)家，所以(yi)其系統架(jia)構和(he)工作模(mo)式非(fei)常復(fu)雜，尤(you)其(qi)是如何協調(tiao)各(ge)儀(yi)器和(he)子(zi)系統之間的工作流(liu)程。本(ben)文(wen)針(zhen)對(dui)該(gai)系統進(jin)行(xing)了(le)時(shi)序研究。
2.1時(shi)序設計原則
考慮(lv)到(dao)溶出(chu)試(shi)驗的(de)要(yao)求和系統架(jia)構，在設(she)計時(shi)序時(shi)的首(shou)要(yao)考慮(lv)是符合藥典(dian)要(yao)求，具體原則如下(xia)。
①溫度控(kong)制(zhi)：很(hen)多(duo)溶出(chu)儀(yi)只(zhi)有壹個(ge)溫度計測(ce)量(liang)水(shui)浴(yu)溫(wen)度，無法測(ce)量各個(ge)溶出(chu)杯中的實際溫(wen)度，因此系統收(shou)到的(de)反(fan)饋溫(wen)度有(you)可(ke)能不是溶出(chu)杯中的實際溫(wen)度，在計算(suan)時(shi)序時(shi)必(bi)須預(yu)留(liu)足(zu)夠(gou)的升(sheng)溫(wen)時(shi)間。對於(yu)可以(yi)檢測到(dao)每(mei)個(ge)杯內(nei)溫度的(de)溶出(chu)儀(yi)，可忽(hu)略此升溫(wen)時(shi)間。
②優先(xian)采樣：對(dui)溶出(chu)度/釋(shi)放度試(shi)驗而(er)言，采樣時(shi)間是影響結(jie)果(guo)的(de)關鍵指標之壹。因此在雙(shuang)溶出(chu)系統的(de)工作時(shi)序中，采樣具(ju)備(bei)優先(xian)級(ji)，即無論系統在幹(gan)什(shen)麽(me)，只(zhi)要到(dao)了(le)采樣時(shi)間，系統就必(bi)須優先(xian)完成(cheng)采樣。
③提高效(xiao)率(lv)：對(dui)整(zheng)個(ge)溶出(chu)過(guo)程(cheng)而(er)言，如果(guo)每(mei)個(ge)樣品(pin)都是按部就班(ban)地進(jin)行(xing)溶出(chu)→采樣→稀(xi)釋→進(jin)樣→讀(du)數→數據(ju)分析，效(xiao)率(lv)太低(di)，尤(you)其(qi)是對於(yu)需要(yao)多(duo)點(dian)溶出(chu)的藥品(pin)。系統擁(yong)有合(he)理的(de)時(shi)間調(tiao)度機(ji)制(zhi)，使(shi)系統能(neng)夠(gou)見縫插(cha)針(zhen)地利用各(ge)個(ge)時(shi)間片(pian)段，進(jin)行(xing)持(chi)續不(bu)斷的工作。
④清(qing)洗片(pian)段：為(wei)了(le)確保空白(bai)品(pin)、標準品(pin)和(he)各樣品(pin)之間沒有(you)交叉(cha)汙染(ran)，在處(chu)理每(mei)個(ge)不同(tong)空(kong)白(bai)品(pin)、標準品(pin)或(huo)樣品(pin)之間都添加(jia)了(le)較(jiao)小的(de)時(shi)間片(pian)段，確保該時(shi)間片(pian)段內系統完成(cheng)采樣針(zhen)及(ji)液路(lu)的(de)清(qing)洗。
⑤防(fang)止沖(chong)突：因為(wei)兩(liang)個(ge)溶出(chu)儀(yi)中12個(ge)樣品(pin)的(de)采樣、稀(xi)釋和進(jin)樣3個(ge)過(guo)程(cheng)都需要(yao)用到(dao)ASP2000的(de)同(tong)壹機(ji)械(xie)臂(bi)，因此必(bi)須計算(suan)時(shi)間提前(qian)量，並且(qie)設(she)計緊急(ji)情況(kuang)處(chu)理機(ji)制(zhi)。
2.2時(shi)序調(tiao)度流(liu)程(cheng)
基於(yu)上述原則，本(ben)研究針(zhen)對雙(shuang)溶出(chu)系統設(she)計了(le)相應(ying)的(de)時(shi)序調(tiao)度流(liu)程(cheng)(見圖(tu)2)，並(bing)通過(guo)軟(ruan)件(jian)使(shi)之實現(xian)。具(ju)體說(shuo)明如下(xia)：啟動(dong)系統後，系統1開(kai)始(shi)投(tou)片(pian)，間隔(ge)約3min系統2開(kai)始(shi)投(tou)片(pian)(階段壹)。系統1采樣時(shi)間到達(da)之前(qian)進(jin)行(xing)液路(lu)清(qing)洗，然(ran)後在系統1采樣時(shi)間點(dian)系統1完成(cheng)采樣，隨(sui)後進(jin)行(xing)補(bu)液；同(tong)時(shi)，在系統2采樣時(shi)間點(dian)系統2完成(cheng)采樣，隨(sui)後進(jin)行(xing)補(bu)液(階段二)。在下(xia)個(ge)采樣時(shi)間到來之前(qian)進(jin)行(xing)標準品(pin)的(de)稀(xi)釋、空白品(pin)和(he)標準品(pin)的(de)UV進(jin)樣及(ji)檢測(階段三)。當采樣時(shi)間到來之前(qian)，系統將(jiang)優先(xian)保證采樣工(gong)作，將(jiang)空白(bai)品(pin)及(ji)標準品(pin)的(de)工作(階段三)暫停(ting)，首(shou)先(xian)完成(cheng)各(ge)系統的(de)采樣工(gong)作(階段二)，完成(cheng)後再進(jin)行(xing)之前(qian)懸掛(gua)的(de)空(kong)白(bai)品(pin)及(ji)標準品(pin)的(de)工作(階段三)。之後逐(zhu)壹稀(xi)釋樣品(pin)並(bing)UV進(jin)樣檢測。檢測完成(cheng)後，自(zi)動(dong)進(jin)行(xing)數據(ju)分析並打印報告(gao)。
3驗(yan)證方法(fa)與結(jie)果(guo)
本(ben)試(shi)驗選(xuan)取(qu)了(le)1片(pian)進(jin)行(xing)系統驗(yan)證，試(shi)驗要(yao)求30mins內采樣5次(ci)，共(gong)60個(ge)樣品(pin)，稀(xi)釋並進(jin)樣檢測。
3.1儀(yi)器與(yu)試(shi)藥
本(ben)試(shi)驗采用英(ying)國(guo)實驗室自(zi)動(dong)化(hua)公(gong)司(ALS)提供(gong)的ASP2000型(xing)雙(shuang)溶出(chu)在線(xian)稀(xi)釋及檢測方(fang)案進(jin)行(xing)驗(yan)證
對照品(pin)(中(zhong)國食(shi)品(pin)藥品(pin)檢定研究院(yuan)，純(chun)度100%，批(pi)號(hao)100599-200502)；1片(pian)(上(shang)海(hai)勃林(lin)格殷(yin)格(ge)翰藥業(ye)有(you)限(xian)公司，規(gui)格30mg，批號084726)；試(shi)劑均為(wei)分析純(chun)，水為(wei)純(chun)化水。
3.2溶出(chu)度試(shi)驗方(fang)法(fa)
依(yi)照溶出(chu)度測(ce)定法(中國(guo)藥典(dian)2010年(nian)版二部附錄XC)中槳(jiang)法(fa)，分別以(yi)水、0.1mol/L鹽(yan)酸、pH4.5乙酸緩沖(chong)液和(he)pH6.8磷(lin)酸緩沖(chong)液900ml為(wei)溶出(chu)介質(zhi)，轉速(su)50r/min，分別於(yu)5、10、15、20和30min時(shi)各取溶液10ml並(bing)過(guo)濾，作為(wei)供(gong)試(shi)品(pin)溶液，即(ji)時(shi)回補(bu)相同(tong)體(ti)積的(de)溶出(chu)介質(zhi)。另取(qu)1對(dui)照品(pin)適(shi)量(liang)，加相應(ying)溶出(chu)介質(zhi)溶解並稀(xi)釋，制成約(yue)33μg/ml的(de)溶液，作為(wei)對(dui)照品(pin)溶液。取(qu)供(gong)試(shi)品(pin)溶液(稀(xi)釋2倍(bei))和對(dui)照品(pin)溶液，參照UV法(fa)(中國(guo)藥典(dian)2010年(nian)版二部附錄IVA)，在244nm波長處(chu)測定吸光度D，計算(suan)每(mei)片(pian)在不(bu)同(tong)時(shi)間點(dian)的溶出(chu)量。
3.3樣品(pin)溶出(chu)結(jie)果(guo)
按(an)“3.2”項下(xia)方法(fa)，在4種(zhong)不(bu)同(tong)介(jie)質(zhi)內對(dui)同(tong)壹批(pi)次的12個(ge)樣品(pin)進(jin)行(xing)溶出(chu)度檢測，同(tong)時(shi)，還(hai)將(jiang)在各(ge)介(jie)質(zhi)中的(de)樣品(pin)溶出(chu)度與(yu)手(shou)工(gong)操(cao)作(溶出(chu)儀(yi)自(zi)動(dong)取(qu)樣，人工完成(cheng)樣品(pin)的(de)稀(xi)釋及UV測定)數據(ju)進(jin)行(xing)對(dui)比(圖(tu)4)，結(jie)果(guo)基(ji)本(ben)壹致(zhi)。
3.4工作效(xiao)率(lv)比較(jiao)
比較(jiao)了(le)ASP2000系統和(he)手(shou)工(gong)操(cao)作的(de)耗時(shi)，人有效(xiao)工作時(shi)間。該系統較(jiao)手(shou)工(gong)方(fang)式(shi)相比效(xiao)率(lv)大(da)幅提高。工(gong)操(cao)作需(xu)時(shi)4min/個(ge)，該試(shi)驗共(gong)240個(ge)樣品(pin)，共(gong)耗時(shi)960min。而(er)使(shi)用ASP2000系統該(gai)項工(gong)作*由(you)系統自(zi)動(dong)完成(cheng)，無需人工幹預，無需消耗人工時(shi)間。ASP2000系統具(ju)有自(zi)動(dong)繪(hui)制溶出(chu)曲(qu)線(xian)及數據(ju)分析的功(gong)能，使(shi)用者(zhe)還(hai)可(ke)省(sheng)去(qu)數據(ju)分析的時(shi)間。此外(wai)，ASP2000系統還(hai)可(ke)利(li)用夜間時(shi)間進(jin)行(xing)工(gong)作，增(zeng)加了(le)有效(xiao)工作時(shi)間。該系統較(jiao)手(shou)工(gong)方(fang)式(shi)相比效(xiao)率(lv)大(da)幅提高。
4討(tao)論(lun)
本(ben)研究采用1片(pian)的(de)溶出(chu)度試(shi)驗驗(yan)證了(le)全自(zi)動(dong)雙(shuang)溶出(chu)在線(xian)稀(xi)釋及檢測系統的(de)時(shi)序設計，結(jie)果(guo)表(biao)明本(ben)法精(jing)度、可(ke)靠(kao)性(xing)都較(jiao)高，並(bing)且能(neng)大(da)幅降(jiang)低(di)勞(lao)動(dong)強(qiang)度，提高工(gong)作效(xiao)率(lv)，適(shi)合(he)於(yu)各種(zhong)片(pian)劑和膠囊(nang)的(de)釋放度研究。系統數據(ju)與(yu)手(shou)工(gong)試(shi)驗數據(ju)對(dui)比結(jie)果(guo)顯(xian)示(shi)，兩(liang)組(zu)數據(ju)具(ju)有(you)壹致(zhi)性(xing)。
