服(fu)務(wu)熱線
86-021-52261560
Product classification
外(wai)泌(mi)體（Exosomes）是由(you)內(nei)體衍生(sheng)的(de)小型脂質納米(mi)顆粒(li)，直(zhi)徑(jing)約(yue) 30-200 納米，大(da)多(duo)數(shu)活(huo)細胞會(hui)通過(guo)胞吐(tu)作(zuo)用(yong)主(zhu)動(dong)分(fen)泌外(wai)泌(mi)體[1]。無(wu)論(lun)是(shi)在病(bing)理還是生(sheng)理狀態下(xia)，外泌體的(de)釋放既(ji)可(ke)以是持續(xu)性(xing)的(de)，也可(ke)以是誘(you)導性(xing)的(de)，且(qie)釋放過(guo)程(cheng)具(ju)有(you)動(dong)態性(xing)、可(ke)控性(xing)和(he)功能(neng)相關性(xing)。外(wai)泌(mi)體的(de)分子組(zu)成與釋放量取(qu)決(jue)於其(qi)來源(yuan)細胞的(de)狀態。外(wai)泌體可(ke)從(cong)多(duo)種細胞系、原代培(pei)養物(wu)中分離獲得，也(ye)可(ke)從(cong)血(xue)清(qing)、血漿、唾液等生(sheng)物(wu)體液中提取(qu)。鑒(jian)於來源(yuan)的(de)多樣(yang)性(xing)，外(wai)泌(mi)體具有(you)多效(xiao)的(de)生(sheng)理功能(neng)，且(qie)越來越多(duo)的(de)研究(jiu)表(biao)明，其(qi)在癌癥(zheng)、感(gan)染性(xing)疾(ji)病(bing)、神(shen)經退(tui)行性(xing)疾(ji)病(bing)等(deng)多(duo)種(zhong)病(bing)理狀態中發揮(hui)著重(zhong)要(yao)作(zuo)用(yong)。因(yin)此，外泌(mi)體成為(wei)液體活(huo)檢方(fang)法(fa)中的(de)關鍵(jian)研(yan)究(jiu)對(dui)象[2]。此(ci)外(wai)，外泌體還可(ke)通過(guo)工(gong)程(cheng)改(gai)造，成為(wei)具(ju)有(you)潛力的(de)藥物(wu)遞(di)送載體[3]。
由於外(wai)泌(mi)體體積微小(xiao)，從(cong)復(fu)雜的(de)生(sheng)物(wu)基(ji)質中分離外(wai)泌體頗具挑(tiao)戰性(xing)，且(qie)分離產(chan)量通常較(jiao)低(di)。在此背景下(xia)，Simple Western™成為(wei)研(yan)究(jiu)外(wai)泌體的(de)理想(xiang)技(ji)術(shu)：該(gai)方(fang)法(fa)僅需(xu) 3 微(wei)升樣(yang)品，且(qie)具備皮克(ke)級(ji)靈敏(min)度，大(da)幅(fu)減少了(le)傳統(tong)Western blot對(dui)所(suo)需(xu)外(wai)泌(mi)體量的(de)要求(qiu)。隨後，可(ke)使(shi)用(yong)針對(dui)外泌體相關抗(kang)原的(de)特(te)異性(xing)檢測抗(kang)體對之(zhi)進行表征(zheng)分(fen)析 —— 這些(xie)目(mu)標抗(kang)原既(ji)可(ke)以是外泌(mi)體的(de)通用(yong)標(biao)誌物(wu)，也(ye)可(ke)以是其(qi)來源(yuan)細胞或體液所有(you)的(de)標誌(zhi)物(wu)。本實(shi)驗(yan)方(fang)案(an)中，我(wo)們將利(li)用(yong)市售的(de)外泌(mi)體標準(zhun)品(pin)和抗(kang)體，通過(guo)Simple Western™檢測外(wai)泌(mi)體的(de)通用(yong)標(biao)誌物(wu)和(he)來源(yuan)特(te)異性(xing)標(biao)誌(zhi)物(wu)。
本篇(pian)文(wen)章介(jie)紹以“人(ren)血(xue)漿、人(ren)血(xue)清(qing)、人(ren)A549細(xi)胞（肺(fei)泡(pao)基(ji)底(di)上(shang)皮腺(xian)癌(ai)細(xi)胞）"三種(zhong)外泌(mi)體標準(zhun)品(pin)為(wei)對(dui)象，驗證下(xia)表中抗(kang)體的(de)有(you)效(xiao)性(xing)的(de)結果：
01. 通用(yong)外(wai)泌體標誌(zhi)物(wu)的(de)表達(da)
• Flotillin-1：作為(wei)經典通用(yong)標(biao)誌物(wu)，在三種(zhong)標準(zhun)品(pin)中均(jun)檢測到(dao)（圖1A）。
• Alix：在三種(zhong)標準(zhun)品(pin)中均(jun)有(you)表達(da)，但A549細胞來源(yuan)外泌(mi)體中表達(da)量更高（圖1D）。
02. 來源(yuan)特(te)異性(xing)標(biao)誌(zhi)物(wu)的(de)表達(da)
• Annexin V：作為(wei)雕(diao)亡標誌物(wu)與(yu)血液抗(kang)凝蛋白(bai)，在A549細胞、血漿來源(yuan)外泌(mi)體中檢測到(dao)，在血清(qing)來源(yuan)外泌(mi)體中未(wei)檢測到(dao)（圖1B）。
• EGFR（HER1）：僅(jin)在A549細胞來源(yuan)外泌(mi)體中檢測到(dao)，血清(qing)、血漿來源(yuan)外泌(mi)體中無(wu)信號（圖1C）。
圖 1 利(li)用(yong)Simple Western™測外(wai)泌(mi)體目(mu)標抗(kang)原。A：flotillin-1；B：Annexin V；C：EGFR；D：Alix。
03. 特(te)殊(shu)處(chu)理需(xu)求(qiu)的(de)標誌(zhi)物(wu)
• CD63：僅(jin)當(dang)用(yong)PNGase F（去(qu)糖基(ji)化酶）處(chu)理外泌體標準(zhun)品(pin)後，才(cai)可(ke)檢測到(dao)信號，提示糖基(ji)化修飾對(dui)該(gai)標(biao)誌物(wu)檢測的(de)影(ying)響（圖2）。
04. 其(qi)他(ta)標(biao)誌物(wu)驗(yan)證
表(biao)2中其(qi)余抗(kang)體（如(ru)Annexin A2、HSPA8/HSC70、TSG101等）均(jun)通過(guo)Simple Western驗(yan)證，可(ke)在對應(ying)外泌(mi)體標準(zhun)品(pin)中檢測到(dao)目(mu)標信號（圖2）。
圖2. 在血漿和 A549 細(xi)胞來源(yuan)的(de)外泌(mi)體標準(zhun)品(pin)中，各(ge)目(mu)標抗(kang)原的(de)檢測泳(yong)道視圖。
—— Simple Western技(ji)術(shu)核(he)心(xin)價值(zhi) ——
(1) 微量高效(xiao)：僅(jin)需(xu)3-5μL外(wai)泌(mi)體裂解液（傳統(tong)WB需(xu)50μL+），適(shi)配珍貴(gui)樣(yang)本；毛(mao)細(xi)管全(quan)流程(cheng)減少樣(yang)本損(sun)耗(hao)，適合(he)低(di)豐(feng)度膜蛋(dan)白(bai)。
(2) 高靈(ling)敏度：皮克(ke)級(ji)檢測下(xia)限，可(ke)測CD63/Alix等(deng)，經PNGase F處理破解糖基(ji)化幹擾(rao)，實現EGFR等特(te)異性(xing)檢測。
(3) 抗(kang)基(ji)質幹擾(rao)：12-230kDa毛細管(guan)電泳(yong)去(qu)雜，外(wai)泌(mi)體裂解後(hou)可(ke)直(zhi)接上機(ji)，無(wu)需(xu)繁(fan)瑣(suo)純(chun)化。
(4) 多重(zhong)定(ding)量(liang)：單(dan)樣(yang)本同(tong)步測8個(ge)靶(ba)點(dian)，符(fu)合(he)MISEV標(biao)準(zhun)，動(dong)態範(fan)圍覆蓋(gai)6個(ge)數(shu)量(liang)級(ji)。
(5) 自動(dong)化流程(cheng)：3小時(shi)全(quan)自動(dong)化出(chu)結果，減少蛋(dan)白(bai)降(jiang)解；每(mei)孔獨(du)立(li)質控，滿足外(wai)泌(mi)體制(zhi)備QC。
(6) 精(jing)準定量：支持絕(jue)對/相對定(ding)量，低(di)樣(yang)本量(liang)+高重(zhong)復(fu)性(xing)，適(shi)配液體活(huo)檢標(biao)誌(zhi)物(wu)開(kai)發，加(jia)速科(ke)研(yan)到(dao)臨床(chuang)轉化。
* 本文(wen)轉載自「ProteinSimple」微(wei)信公(gong)眾(zhong)號(hao)
* 參考(kao)文(wen)獻(xian):
1. Exosomes, D M Pegtel and S J Gould, Annual Review of Biochemistry, 2019, 88:487–514.
2. Extracellular vesicles – biomarkers and effectors of the cellular interactome in cancer, J Rak, Frontiers in Pharmacology, 2013, 4:21.
3. Exosomes as reconfigurable therapeutic systems, R Conlan, S Pisano, M Oliveira, M Ferrari and I Mendes Pinto, Trends in Molecular Medicine, 2017, 23(7):636–650.
▍關於ProteinSimple：
ProteinSimple 是(shi)美(mei)國納斯達(da)克上市公(gong)司(si)Bio-Techne集(ji)團(tuan) (NASDAQ:TECH) 旗下(xia)的(de)蛋白(bai)質分析(xi)品牌(pai)。“使(shi)蛋(dan)白(bai)質分析(xi)更簡(jian)單(dan)"是ProteinSimple 壹直(zhi)以來的(de)願景。ProteinSimple長(chang)期致力(li)於研(yan)發和生(sheng)產(chan)更精(jing)準、更快速、更靈(ling)敏的(de)創新(xin)性(xing)蛋(dan)白(bai)質分析(xi)工(gong)具(ju)，包(bao)括(kuo)蛋白(bai)質電荷(he)表征(zheng)、蛋(dan)白(bai)質純度分析(xi)、蛋白(bai)質翻譯(yi)後(hou)修飾定(ding)量(liang)檢測、蛋(dan)白(bai)質免疫(yi)檢測技(ji)術(shu)如(ru)數(shu)字Western Blot和高靈(ling)敏微流控多重(zhong)ELISA，以幫助生(sheng)物(wu)制(zhi)藥、細(xi)胞與基(ji)因(yin)治(zhi)療(liao)、生(sheng)物(wu)醫(yi)學和(he)生(sheng)命(ming)科(ke)學(xue)等(deng)領(ling)域科(ke)學(xue)家(jia)解決(jue)蛋白(bai)質分析(xi)問題(ti)，加(jia)速藥(yao)物(wu)研(yan)發效(xiao)率(lv)，深(shen)度解析(xi)蛋白(bai)質和疾(ji)病(bing)的(de)關系。作(zuo)為(wei)ProteinSimple華東大(da)區 (江(jiang)、浙、滬、皖(wan)、山東) 的(de)授(shou)權(quan)代理商(shang)，上(shang)海(hai)昊(hao)擴(kuo)將為(wei)大(da)家(jia)提(ti)供ProteinSimple旗下儀(yi)器(qi)設(she)備。
▍關於上(shang)海(hai)昊(hao)擴(kuo)：
上(shang)海(hai)昊(hao)擴(kuo)科(ke)學(xue)器(qi)材(cai)有(you)限公(gong)司(si)成(cheng)立(li)於2019年(nian)，總(zong)部(bu)位(wei)於上(shang)海(hai)，是壹(yi)家(jia)實(shi)驗室設備(bei)/耗(hao)材(cai)及分析儀器(qi)的(de)專業服(fu)務(wu)商(shang)。公(gong)司(si)致力(li)於為(wei)生(sheng)物(wu)、醫(yi)藥、物(wu)性(xing)檢測、化工(gong)分(fen)析(xi)、食(shi)品(pin)、工(gong)業生(sheng)產(chan)等相關領(ling)域客(ke)戶(hu)提供國內外高科(ke)技(ji)專(zhuan)業設(she)備(bei)以及技(ji)術(shu)咨(zi)詢(xun)服(fu)務。
Copyright © 2026 版(ban)權(quan)所有(you)：上海(hai)昊(hao)擴(kuo)科(ke)學(xue)器(qi)材(cai)有(you)限公(gong)司(si) ICP備(bei)案(an)號(hao):滬ICP備20016915號-1 管理登陸(lu) 技(ji)術(shu)支(zhi)持(chi)：化工(gong)儀(yi)器(qi)網 總(zong)流量(liang)：230478 網站(zhan)地圖