使(shi)用NanoPhotometer®豐富的應用程序進(jin)行(xing)ADC藥(yao)物分析

抗體(ti)-藥(yao)物偶聯物即ADC是(shi)壹類生(sheng)物制藥(yao)藥(yao)物，是通(tong)過(guo)化學(xue)鏈(lian)將具有生(sheng)物活性的小分子(zi)藥(yao)物連接到抗體(ti)上，抗體(ti)作(zuo)為載體將小分子(zi)藥(yao)物靶向(xiang)運(yun)輸到目標細胞(bao)中(zhong)被(bei)設(she)計用於(yu)治療(liao)癌癥(zheng)的靶向(xiang)療(liao)法。與化學(xue)療(liao)法不同(tong)，ADC 旨(zhi)在(zai)靶向(xiang)並殺死腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)，同(tong)時(shi)保留健康細胞(bao)。類似(si)的還有新(xin)興(xing)的AOC（抗體(ti)-寡(gua)核苷(gan)酸(suan)偶聯物）基因(yin)治(zhi)療(liao)技術。

NanoPhotometer®超微(wei)量(liang)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計作(zuo)為(wei)標準(zhun)的紫外(wai)-可(ke)見(jian)法(fa)分析設(she)備，已廣泛的應用於(yu)包括(kuo)ADC在(zai)內的單抗、雙(shuang)抗的定量(liang)。同(tong)時(shi)，設(she)備的多(duo)波長(chang)/全(quan)波(bo)長測量(liang)功(gong)能(neng)，能(neng)夠(gou)同(tong)時(shi)測量(liang)抗體(ti)及偶聯物的吸光(guang)值和濃度。這使(shi)測量(liang)藥(yao)物抗體(ti)比(bi)（DAR）變(bian)得(de)十分(fen)方(fang)便(bian)。DAR能(neng)明(ming)顯(xian)影(ying)響ADC藥(yao)物的毒(du)性。如DAR過(guo)低，則(ze)抗體(ti)攜(xie)帶(dai)的效率較(jiao)低；反之(zhi)，如(ru)DAR 過(guo)高，機(ji)體易(yi)將其(qi)識(shi)別(bie)為異(yi)物從而快速(su)清除(chu)。DAR的異(yi)質性也可(ke)能(neng)導(dao)致(zhi)毒(du)性的不確定，造成(cheng)毒(du)性脫(tuo)靶。

應(ying)用程序1  UV法蛋白定(ding)量(liang)

標(biao)準的UV法蛋白定(ding)量(liang)模塊，提供(gong)基於消(xiao)光(guang)系數法的蛋白濃度測量(liang)，測量(liang)主(zhu)波長默認(ren)為280nm，同(tong)時(shi)也可(ke)根據抗體(ti)樣品(pin)實(shi)際的最大吸收波(bo)長進(jin)行(xing)設(she)置。對於空載抗體(ti)的定量(liang)，通(tong)常(chang)使(shi)用默認(ren)的UV280法，並(bing)使用默認(ren)的320nm背景(jing)校(xiao)正。當測量(liang)ADC樣品(pin)時(shi)，由(you)於(yu)偶(ou)聯藥(yao)物的吸收峰通(tong)常(chang)出(chu)現在(zai)300-400nm之(zhi)間(jian)，並(bing)於抗體(ti)之(zhi)間(jian)有(you)連續(xu)的紫外(wai)吸收，因(yin)此建(jian)議(yi)關(guan)閉(bi)背(bei)景(jing)校(xiao)正功能(neng)（對於澄清(qing)樣品(pin)），以(yi)獲得準(zhun)確(que)的吸光(guang)值/濃度。在(zai)此模式下(xia)，如想(xiang)在(zai)獲得抗體(ti)濃度的同(tong)時(shi)，也測量(liang)偶(ou)聯物的吸光(guang)值，可(ke)點擊(ji)光(guang)譜(pu)曲(qu)線，可(ke)選(xuan)擇(ze)查(zha)看(kan)任(ren)意波長(chang)下(xia)的吸光(guang)值，找(zhao)到對應的偶聯物的最大吸收波(bo)長和吸光(guang)值即可(ke)。

應(ying)用程序2  多(duo)波長(chang)測量(liang)

在(zai)分析化學(xue)應用界面(mian)中(zhong)，選(xuan)擇(ze)單/多(duo)波長(chang)測量(liang)模塊，根據抗體(ti)和偶聯物的最大吸收波(bo)長，進(jin)行(xing)測量(liang)波(bo)長設(she)置，並(bing)進(jin)行(xing)背(bei)景(jing)校(xiao)正波長(chang)設(she)置（可(ke)根據需要設(she)置在(zai)可(ke)見(jian)光(guang)/近(jin)紅(hong)外(wai)波(bo)長區(qu)域(yu)）。測量(liang)結(jie)果(guo)可(ke)直(zhi)接顯(xian)示(shi)抗體(ti)和偶聯物的吸光(guang)值，並(bing)輸(shu)出為(wei)報告。

應用程序3  比值測量(liang)

核(he)酸(suan)樣品(pin)的A260/A280、A260/A230比值是(shi)大(da)家(jia)熟知的，而對於其(qi)他(ta)樣品(pin)而言，吸光(guang)值比(bi)值測量(liang)模塊可(ke)支持自(zi)定義的雙(shuang)波長(chang)下(xia)吸光(guang)值比(bi)值的計算(suan)。如(ru)抗體(ti)測量(liang)A280值，偶(ou)聯物測量(liang)A378，則(ze)可(ke)得(de)到兩(liang)個波(bo)長的吸光(guang)值和比值結(jie)果(guo)，並輸出為報(bao)告。

ADC樣品(pin)測量(liang)的良好實(shi)踐(jian)：

1. 可(ke)使(shi)用N60/NP80的混勻器(qi)進(jin)行(xing)5-10秒(miao)的樣品(pin)充(chong)分(fen)混勻

2. 基於測量(liang)目的，選(xuan)擇(ze)對應的應用程序

3. 正確設(she)置背(bei)景(jing)校(xiao)正波長(chang)，這非常(chang)重(zhong)要(yao)

4. 正確的清潔(jie)，高濃度或高粘度(du)樣品(pin)建(jian)議(yi)進(jin)行(xing)空白回測

NanoPhotometer®還可(ke)配置符(fu)合GxP及《藥(yao)品(pin)數(shu)據管理規(gui)範(fan)》要(yao)求的合規(gui)性軟件，具有多(duo)層(ceng)級(ji)用戶(hu)管理(li)、電子記(ji)錄(lu)和電子簽(qian)名(ming)、審計追蹤和接入(ru)控(kong)制等功能(neng)，滿(man)足客(ke)戶的合規(gui)性流程需要，在(zai)包括(kuo)ADC在(zai)內的生(sheng)物制藥(yao)工藝(yi)開(kai)發(fa)、中(zhong)試、生(sheng)產、質(zhi)控(kong)中(zhong)具有廣(guang)泛的使用場景(jing)和用戶(hu)基礎。

* 本文(wen)轉載自「Implen超(chao)微(wei)量(liang)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計」公(gong)眾(zhong)號(hao)